PCR技術的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結合到模板上，探針的結合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題，反應結束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術的缺點：
成本高；
設計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
抑霉唑標準溶液(10μg/ml,u=2%)mTOR AntibodyN-叔丁氧羰基-N'-芐氧羰基-D-鳥氨酸

吡蟲啉標準溶液(1mg/ml,溶劑：甲)Phospho-CD79A (Tyr182) (D1B9) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)己基噻吩

稻瘟靈標準溶液(10μg/ml,u=2%)Phospho-mTOR (Ser2481) Antibody氯鉑酸

甲霜靈標準溶液(100μg/ml,u=5%)Phospho-mTOR (Ser2481) Antibody芐氧基溴芐

標準溶液(100μg/ml,u=5～3%,酮)Phospho-mTOR (Ser2481) AntibodyN-芐基吡咯烷-甲酸甲酯

殺螟硫(標準品)Rabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control (Alexa Fluor® 488 Conjuga)(S)-異基-2-唑烷酮

鄰二甲酸二甲酯(標準品)Phospho-mTOR (Ser2448) (49F9) Rabbit mAb (IHC Specific)丁烷四羧

對二氯(分析標準品,>99.8%(GC))Phospho-mTOR (Ser2448) (49F9) Rabbit mAb (IHC Specific)雙酮-D-甘露糖

對二氯標準溶液(0.102mg/ml,基體：異辛烷)NOS (pan) Antibody六氟酸

1,二氯-d4(98% D, 98% (CP))Cyclin D1 (92G2) Rabbit mAb硫酸鈰

間二氯(標準品)Cyclin D1 (92G2) Rabbit mAb間甲氧基甲酰氯

二溴氯烷(標準品)Serine Racemase (D5V9Z) Rabbit mAb溴甲酰氯

2,二硝基氯標準溶液(1000μg/ml,溶劑：甲)Phospho-SRC-3 (Thr24) Antibody基甲酰氯

甲基毒死蜱標準溶液(100μg/ml,u=6～4%,酮)Caldesmon-1 Antibody2-氟-5-吡啶

矮壯素(標準品)Phospho-(Ser) Arg-X-Tyr/Phe-X-pSer Motif Antibody酸頻哪酯

菌靈(標準品)iNOS Antibody (Mouse Specific)1-溴芘

蕓苔素內(nèi)酯(標準品)mTOR (7C10) Rabbit mAb羥基環(huán)己烷甲酸乙酯

因標準溶液(10μg/ml,基體:酮)mTOR (7C10) Rabbit mAb枸櫞酸非
節(jié)狀古柏線蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒綿羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒PACAP R1/VIP receptor-I  腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體-I抗體100 ul

綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒PACAP-27/38  腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27/38抗體100 ul

綿羊白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒PACAP-38  腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38抗體20 ul

綿羊白介素13(IL-13)ELISA試劑盒PADI4  關節(jié)炎相關基因抗體300 ul

綿羊白介素12(IL-12)ELISA試劑盒PAF  血小板活化因子抗體100 ul

綿羊白介素10(IL-10)ELISA試劑盒PALB2  癌易感基因相關蛋白2100 ul

綿羊白蛋白(Albumin)ELISA試劑盒PAFAH2/Lp-PLA2  脂蛋白脂酶A2抗體1Kit

綿羊γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒PAFR/PTAFR  血小板活化因子受體抗體100 ul

綿羊C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒PAK1  p21激活激酶1抗體100 ul