特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
4,4'-二氟環(huán)己鹽酸鹽Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr951) (15D2) Rabbit mAb2-萘乙酮

積雪草酸Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr951) (15D2) Rabbit mAb2,二

積雪草酸（標(biāo)準(zhǔn)品）PABP1 Antibody間氨基乙酮

佛司可林(標(biāo)準(zhǔn)品)SMG-1 (Q25) Antibody間羥基甲酸

黃藤素(標(biāo)準(zhǔn)品)NIK Antibody檸酸

鹽酸西那卡塞；鹽酸甲狀旁腺激素NIK Antibody2,2,2-三氯乙酰

黃藤素CUL1 Antibody硫

鏈霉蛋白酶/鏈絲菌蛋白酶/鏈霉菌蛋白酶UBC3 Antibody2,2'-二硫二吡啶

抗蛋白酶(進(jìn)口)UBC3 Antibody硝基兒茶酚

D-巖藻糖NFAT4 Antibody氨基丁酸

N-乙酰-DL-絲氨酸Phospho-RelB (Ser552) Antibody膽固甲酰氯

玉米素JunD (D17G2) Rabbit mAb氨基甲酸

水飛薊素MyD88 (E9K4E) Mouse mAb對(duì)二基甲

水飛薊素CaMKII-α (6G9) Mouse mAb對(duì)乙基

鐵蛋白Vasopressin (D8T3K) Rabbit mAb甲

鵝去氧膽酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-AMPKα (Thr172) (D4D6D) Rabbit mAb2,5-二溴間二甲

鵝去氧膽酸Phospho-Akt (Ser473) (D9E) XP® Rabbit mAb (Biotinylad)對(duì)二甲酰氯

胰島素(牛)p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb (Biotinylad)二水合鋨酸
貓庖疹病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒軸抑制蛋白2抗體BrdU/FITC  熒光素標(biāo)記溴脫氧尿苷抗體IgG100 ul

血管生成素相關(guān)蛋白6抗體SMARCA4/SNF2 beta/FITC  熒光素標(biāo)記抑癌基因SNF2β抗體IgG100 ul

Muellerian繆勒管激素抑制因子抗體BRMS-1/FITC  熒光素標(biāo)記癌轉(zhuǎn)移抑制基因1抗體IgG300 ul

酪氨酸蛋白激酶受體A8抗體BTG2/TIS21/FITC  熒光素標(biāo)記B細(xì)胞遷移基因2抗體IgG100 ul

脂肪酰輔酶A家族成員1抗體Brucella/FITC  熒光素標(biāo)記抗布魯氏菌抗體IgG300 ul

芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白樣2抗體Brucella/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記抗布魯氏菌抗體IgG100 ul

酸化芳香N-乙酰化轉(zhuǎn)移酶抗體Brucella/Biotin  生物素標(biāo)記抗布魯氏菌抗體IgG20 ul

肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白1抗體BSEP/FITC  熒光素標(biāo)記膽汁酸鹽輸出泵蛋白抗體IgG100 ul

粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體BSP/FITC  熒光素標(biāo)記骨涎蛋白抗體IgG100 ul