產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱：反芻獸曼氏桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
英文名稱：Mannheimia ruminalisPCR
編號(hào)：HE31193-R
類別:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
?
儲(chǔ)需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn)：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡(jiǎn)單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
保存條件：
僅用于科研14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
二氫辣椒堿英文名稱 Stachydrine分 子 量： 143.18CAS NO.： 471-87-4純 度： ≥98%分子式： C7H13NO2性狀: 白色結(jié)晶性粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g，可按客戶需求包裝！用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn):溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑；提取來(lái)源: 益母草藥理藥效: 水蘇堿具有提高冠狀動(dòng)脈、心肌營(yíng)養(yǎng)性血流量、減少心肌細(xì)胞壞死的作用鑒別方法: NMR；Ms檢測(cè)方法: HPLC-ELSD:乙腈：0.2%冰醋酸溶液（80:20）(僅供參考）貯存條件: 低溫冷藏，避光，密封，干燥注意事項(xiàng):

二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯英文名稱 Sudan II分 子 量： 276.33CAS NO.： 3118-97-6純 度： ≥98%分子式： C18H16N2O性狀: 棕紅色結(jié)晶規(guī)格: 20mg/50mg/1g，可按客戶需求包裝！用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn):溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑；提取來(lái)源: 合成染料藥理藥效: 蘇丹紅Ⅱ可作殺真菌劑，染料鑒別方法: NMR；Ms檢測(cè)方法: HPLC貯存條件: 低溫冷藏，避光，密封，干燥注意事項(xiàng):

二氫石蒜堿英文名稱 Eriodictyol分 子 量： 288.25CAS NO.： 552-58-9純 度： ≥98%分子式： C15H12O6性狀: 淡黃色粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g，可按客戶需求包裝！用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn):溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑提取來(lái)源: 花生殼peanutshell藥理藥效: 圣草酚具有抗氧化，抗輻射，降血脂，降血糖的作用鑒別方法: NMR；Ms檢測(cè)方法: 乙腈：0.2%磷酸水=35:65   254nm貯存條件: 低溫冷藏，避光，密封，干燥注意事項(xiàng):

二氫英文名稱 Cyanidin-3-O-glucoside chloride分 子 量： 484.84CAS NO.： 7084-24-4純 度： ≥98%分子式： C21H21ClO11性狀: 棕紅色結(jié)晶粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g，可按客戶需求包裝！用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn): 補(bǔ)充中溶解性: 易溶于甲醇、乙醇、丙酮中，可溶于水，不溶于、等非極性溶劑中提取來(lái)源: 黑豆皮水提取，栽培紫菀，覆盆子，毛薯，紫背天葵,矢車菊地上部分藥理藥效: 矢車菊素-3-O-葡萄糖苷具有抗炎、預(yù)防毛細(xì)血管脆裂的作用鑒別方法: NMR；Ms檢測(cè)方法: RP-HPLC:0.4%磷酸水：乙腈=88:12 鎢燈λ：535nm（僅供參考）或乙腈：0.2%磷酸水溶液=13:87波長(zhǎng)：520nm貯存條件: 低溫冷藏，避光，密封，干燥注意事項(xiàng): 補(bǔ)充中

二氫小檗堿英文名稱 Spinosin分 子 量： 608.546CAS NO.： 72063-39-9純 度： ≥98%分子式： C28H32O15性狀: 類白色結(jié)晶粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g，可按客戶需求包裝！用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn): 149°C溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑；提取來(lái)源: 酸棗仁藥理藥效: 斯皮諾素具有鎮(zhèn)靜、安神、催眠的作用鑒別方法: NMR；Ms檢測(cè)方法: RP-HPLC:乙腈：水梯度梯度洗脫  λ：335nm(僅供參考）貯存條件: 低溫冷藏，避光，密封，干燥注意事項(xiàng): 補(bǔ)充中

二氫血根堿英文名稱 Sudan IV；Solvent Red 24分 子 量： 380.44CAS NO.： 85-83-6純 度： ≥98%分子式： C24H20N4O性狀: 褐色粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g，可按客戶需求包裝！用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn):溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑；提取來(lái)源: 合成藥理藥效: 蘇丹紅Ⅳ可作染色劑，油漆，脂肪著色劑，醫(yī)藥防腐劑鑒別方法: NMR；Ms檢測(cè)方法: HPLC貯存條件: 低溫冷藏，避光，密封，干燥注意事項(xiàng):

二氫楊梅素英文名稱 Pinoresinol diglucoside分 子 量： 682.668CAS NO.： 63902-38-5純 度： ≥98%分子式： C32H42O16性狀: 白色結(jié)晶粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g，可按客戶需求包裝！用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn):溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機(jī)溶劑；提取來(lái)源: 杜仲藥理藥效: 松脂醇二葡萄糖苷具有抗氧化、抗腫瘤、增強(qiáng)免疫力、抗疲勞、抗衰老的作用鑒別方法: NMR；Ms檢測(cè)方法: RP-HPLC:甲醇：水（25:75）  λ：277nm(僅供參考）貯存條件: 低溫冷藏，避光，密封，干燥注意事項(xiàng):

二氫醉椒素英文名稱 Carnosol分 子 量： 330.42CAS NO.： 5957-80-2純 度： ≥98%分子式： C20H26O4性狀: 白色結(jié)晶粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g，可按客戶需求包裝！用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn): 240 - 242°C溶解性: 溶于乙醇、丙酮和油脂,不溶于水提取來(lái)源: 迷迭香RosmarinusofficinalisL藥理藥效: 鼠尾草酚具有抗輻射，抗氧化，抗癌的作用鑒別方法: NMR；Ms檢測(cè)方法: RP-HPLC:乙腈-0.5％磷酸溶液(75：25)  λ：230nm(僅供參考）貯存條件: 低溫冷藏，避光，密封，干燥注意事項(xiàng): 補(bǔ)充中

二十八烷醇英文名稱 Amentoflavone分 子 量： 538.46CAS NO.： 1617-53-4純 度： ≥98%分子式： C30H18O10性狀: 黃色結(jié)晶粉末規(guī)格: 20mg/50mg/1g，可按客戶需求包裝！用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實(shí)驗(yàn)等熔點(diǎn): 245 - 250°C溶解性: 易溶于DMSO，溶于甲醇、乙醇、丙酮，不溶于石油醚。提取來(lái)源: 卷柏，杉木枝葉藥理藥效: 穗花杉雙黃酮具有抗腫瘤、清除自由基、舒張血管、降血糖的作用鑒別方法: NMR；Ms檢測(cè)方法: RP-HPLC:甲醇：0.1%磷酸溶液梯度洗脫  λ：330nm(僅供參考）貯存條件: 低溫冷藏，避光，密封，干燥注意事項(xiàng): 補(bǔ)充中
反芻獸曼氏桿菌PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書化硫代乙酰膽堿有效期: 2年溶解性: 50mg/ml MeOH別名: 2-(乙酰硫代)-N,N,N-*基乙銨化物;化硫代乙酰膽堿;代硫代乙酰膽堿;化乙酰硫代膽堿;化-S-乙酰硫代膽堿;乙酸-N-(2-巰基乙基)*基化銨;S-乙酰硫代膽堿化物;硫代乙酰膽堿(化)英文名稱: ACETYLTHIOCHOLINE IODIDE

卵磷脂(大豆)有效期: 2年溶解性: 100mg/mL in CHCL3來(lái)源: from soybean,Type II-S,別名: L-α-磷脂酰膽堿；L-α-Phosphatidylcholine

海藻酸鈉有效期: 5年級(jí)別: CP溶解性: 10 mg/mL in water別名: 褐藻膠 褐藻酸鈉 藻膠鈉 藻朊鈉

聚乙二醇 PEG 4000有效期: 3年級(jí)別: Biotechnology Grade溶解性: 100mg/ml in Water別名: 聚氧乙烯4000；Polyglycol, Polyethylene oxide；Polyoxyethylene； PEG4000

β-甘油磷酸二鈉鹽有效期: 7年溶解性: 200mg/ml in water別名: β-甘油磷酸鈉；Disodium β-glycerol phosphate英文名稱: β-Glycerol phosphate disodium salt pentahydrate

植物凝膠有效期: 3年級(jí)別: plant cell culture tested別名: Agar substitute gelling agent；Gellan Gum英文名稱: Phytagel

魯米諾有效期: 3年溶解性: 50 mg/ml Water別名: 3-氨基苯二甲酰肼; 發(fā)光氨英文名稱: 5-Amino-2,3-dihydro-1,4-phthalazinedione

甜菜堿鹽酸鹽有效期: 2年級(jí)別: Ultra  Pure Grade溶解性: 1g/mL in water別名: Acidol；Lycine hydrochloride；Oxyneurine hydrochloride
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
技術(shù)原理：
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。