特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結合到模板上，探針的結合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題，反應結束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術的缺點：
成本高；
設計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
硫酸鎳六水GFAP (D1F4Q) XP® Rabbit mAb2-吡啶甲酰肼

乙酸銨(分子生物學級)GFAP (D1F4Q) XP® Rabbit mAb2-羥基-5-乙酮

微晶纖維素(100 um)YAP (1A12) Mouse mAb5-溴-2-羥基乙酮

糖；α-糖,一水BNIP3L/Nix (D4R4B) Rabbit mAbBOC-L-焦谷氨酸乙酯

氯化鈣二水Phospho-DNAJC2/MPP11 (Ser47) Antibody2-溴-5-氯甲

乙二Malic Enzyme 2 Antibody2-溴-3,5-二氯吡啶

硫酸鎂七水(分子生物學級)PI3 Kinase Class II α (D3Q5B) Rabbit mAb1,二氫異并呋喃

糖化酶;葡萄糖淀粉酶SignalSilence® FLIP siRNA II2,4,5-三氟甲

乙酰Ezh2 (D2C9) XP® Rabbit mAb (Biotinylad)3,二氟甲酸乙酯

聚乙二4000SOS1 (D3T7T) Rabbit mAb1-BOC-氨甲基哌啶

無水酸氫二p44/42 MAPK (Erk1/2) Blocking Peptide (#4695 Specific)2-溴-6-氟吡啶

甲酰SignalSilence® p27 Kip1 siRNA II2,6-二氟-

聚乙二8000Immunofluorescence Blocking Buffer去甲托品鹽酸鹽

氯化鋰(分子生物學級)PAX3 Antibody2,二氟氯

硫酸亞鐵銨六水α-Actinin (D6F6) XP® Rabbit mAb (HRP Conjuga)溴-羥基甲酸

紅四氮唑SignalSilence® UCHL1 siRNA II氨基

磺甲氧噠CARD9 Antibody氯代肟基乙酸乙酯

磺甲氧噠(標準品)CK1δ AntibodyL-(+)-環(huán)己基甘氨酸
巴爾通體通用探針法熒光PCR檢測試劑盒豚鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒E2 tag  E2 tag標簽抗體100 ul

豚鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒HPV16 E7 proin  頭瘤病毒16型E7抗體20 ul

豚鼠基質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒EAAT1/Glast  膠質細胞谷氨酸運載蛋白1抗體300 ul

豚鼠基質金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒EAAT2  膠質細胞谷氨酸運載蛋白2抗體100 ul

豚鼠黃體激素(LH)ELISA試劑盒EAAT3  膠質細胞谷氨酸運載蛋白3抗體100 ul

豚鼠環(huán)酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒EBNA 3A  EB病毒核抗原-3A抗體100 ul

豚鼠環(huán)酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒ECE1  內(nèi)皮素轉化酶1抗體100 ul

豚鼠過氧化脂質/過氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒ECE2  內(nèi)皮素轉化酶2抗體300 ul

豚鼠鉤端螺旋體IgG(Leptospira)ELISA試劑盒ECG2  食道癌相關基因抗體100 ul