PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。

?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實(shí)驗(yàn)時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強(qiáng)度信號，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)ELISA試劑盒 英文名稱：Human angiostatin，ANG ELISA Kit進(jìn)口/分裝

人血紅蛋白C(HbC)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Hemoglobin C，HbC ELISA Kit進(jìn)口/分裝

Tetracycline/OVA 四環(huán)素偶聯(lián)雞卵白蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 2mg

Anti-CEA 癌胚抗原抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh ODC 鳥氨酸脫羧酶抗體 規(guī)格 0.2ml

Western Transfer Buffer 電轉(zhuǎn)移緩沖液(Western轉(zhuǎn)膜液 粉劑) 1L

Tyk2 英文名稱： 非受體酪酸蛋白激酶2抗體 0.2ml

C11orf65 英文名稱： 11號染色體開放閱讀框65抗體 0.2ml

Anti-Phospho-IRF3 (Ser396) 酸化干擾素調(diào)節(jié)因子3Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

GLUT1(Human Glucose transporter 1) ELISA Kit 人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-MEF2A (Thr312) 酸化肌細(xì)胞增強(qiáng)因子2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Jagged1/CD339 Jagged1/CD339抗體 規(guī)格 0.1ml

PT(Human Pertussiu Toxin) ELISA Kit 人百日咳毒素 96T

PMCA1 英文名稱： 細(xì)胞膜鈣ATP酶1抗體 0.2ml

無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員9A 多克隆抗體WNT9A Polyclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul

無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員9B 多克隆抗體WNT9B Polyclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul

胚性腺肌肉瘤1 多克隆抗體WT1 Polyclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul

含WW域轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白1 多克隆抗體WWTR1 Polyclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul

趨化因子(C基元)配體2 多克隆抗體XCL2 Polyclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul

XC趨化因子受體1 多克隆抗體XCR1 Polyclonal Antibody700/30ul#1540/100ul#2520/200ul
精氨酸支原體探針法熒光PCR檢測試劑盒CD36抗體Shank1/FITC  熒光素標(biāo)記shank-1抗體IgG300 ul

固酮合成酶CYP11B2抗體SHBG /FITC  熒光素標(biāo)記性激素結(jié)合球蛋白抗體IgG100 ul

7號染色體開放閱讀框16抗體Shh/FITC  熒光素標(biāo)記Shh信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路膜蛋白受體抗體IgG100 ul

10號染色體開放閱讀框62抗體Shiga-like toxin IIe variant subunit A/FITC  熒光素標(biāo)記抗豬水腫病大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體（O139菌株）抗體IgG100 ul

胃癌多藥耐藥相關(guān)蛋白SHC/FITC  熒光素標(biāo)記SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgG100 ul

酪蛋白激酶casein kinase Iα抗體phospho-SHC (Tyr239/240)/FITC  熒光素標(biāo)記酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgG100 ul

酸化酪蛋白激酶casein kinase Iα抗體phospho-SHC (Ser36) /FITC  熒光素標(biāo)記酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgG100 ul

酸化酪蛋白激酶casein kinase Iα抗體phospho-SHC (Tyr349) /FITC  熒光素標(biāo)記酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgG100 ul

肌動蛋白調(diào)節(jié)蛋白CAPG抗體phospho-SHC (Tyr427) /FITC  熒光素標(biāo)記酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgG100 ul