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耐久腸球菌PCR檢測試劑盒說明書

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更新日期:
2024-08-27
點擊次數(shù):
1004
產(chǎn)品特點:
耐久腸球菌PCR檢測試劑盒說明書實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
  50T耐久腸球菌PCR檢測試劑盒說明書的詳細資料:

特點優(yōu)勢:
    1.   特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
    2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
    4.   實用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
     5.   優(yōu)勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
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服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱

 耐久腸球菌PCR檢測試劑盒說明書

 英文名稱

 Enterococcus duransPCR

 貨號

 HE30937-R

實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)-3-甲基鈉鹽/N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)間甲鈉鹽/TOOS sodium salt 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;5g

N-乙基-N-(3-磺丙基)-3-甲基鈉鹽/N-乙基-N-(3-磺丙基)間甲鈉鹽/TOPS sodium salt 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;25g

雙向電泳指示劑/Tracking Dye-2D 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;5g

堿性藍26/維多利亞藍B/堿性品藍B/堿性艷藍B/鹽基品藍B/維多利亞蘭B/品藍B/勝利藍B/Basic Blue 26 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;1g

Yariv′s Reagent 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;25g

2,4-二羥基-4’-硝基偶氮苯/對偶氮間苯二酚/鎂試劑I/偶氮紫/偶氧紫/(對偶氮)間苯二酚/4-(4-偶氮)間苯二酚/Azoviolet 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;5g

4-[(2,4-二羥基苯基)偶氮]苯磺酸鈉/間苯二酚磺/金蓮橙O/酸性橙6/金蓮橙/間苯二酚品黃/偶氮間苯二酚磺酸鈉/樹脂酚黃O/Tropaeolin O sodium salt 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;1g

耐爾藍A/5-氨基-9-(二乙基氨基)苯并[α]吩惡嗪-7-翁硫酸鹽/硫酸耐爾藍/硫酸尼羅藍/耐爾藍/耐爾蘭A/尼羅藍A/耐爾蘭/尼羅蘭A/Nile Blue A 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;5g

尼羅紅/尼羅絲/Nile Red 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;1g

酞菁/戊基萘腈/酞菁/酞菁氧化釩/氧化鋇酞菁/酞菁氧化釩(IV)/釩氧酞菁/Oxyvanadium phthalocyanine 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;25g

間硝基酚/3-酚/間酚/3-硝基酚/3-Nitrophenol 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;5g

二還原茚三酮/還原茚三酮二合物/茚烷錫二合物/二合茚烷錫/Hydrindantin dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;1g

直接N/直接黑EX/直接青光元/直接元/直接元青/氯唑黑/卡拉唑黑E/酸性綠光直接黑/直接黑38/Direct Black 38 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;5g

固紅B/標準重氮色鹽玫瑰紅/B紅鹽/固紅B鹽/Fast red B salt 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;1g

5(6)-羧基二乙酸熒光素琥珀酰亞胺酯/5(6)-羧基二醋酸乙酸熒光素琥珀酰亞胺酯/二乙酸-N-琥珀酰亞胺酯羰基熒光素/CFSE 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;5g

固紅B二磺酸萘鹽/2-甲氧基-4-硝基-苯重氮1,5-萘二磺酸鹽/耐曬紅B,1,5-萘二磺酸鹽/Fast red B salt 1,5-Naphthalenedisulfonate 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;1g

羥基萘酚藍/色酚蘭/Hydroxynaphthol blue 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 包裝;250mg
耐久腸球菌PCR檢測試劑盒說明書Campylobacter│fetus subsp.jejuni 中文名稱:胎兒彎曲菌空腸亞種種屬:Campylobacter│fetus subsp.jejuni提供形式:凍干物安全等級:3模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:制備血清  1培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0112生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98+%,ee 99%

Moraxella│lacunata 中文名稱:腔隙莫拉氏菌種屬:Moraxella│lacunata提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0010生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:99+%

Neisseria│subflava 中文名稱:微黃色奈瑟氏菌種屬:Neisseria│subflava提供形式:凍干物安全等級:3模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0109生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:99+%

Providencia│stuartii 中文名稱:司徒氏普羅菲登斯菌種屬:Providencia│stuartii提供形式:其他安全等級:3模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:4 4培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:99+%

Providencia│alcalifaciens 中文名稱:產(chǎn)堿普羅菲登斯菌種屬:Providencia│alcalifaciens提供形式:其他安全等級:3模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:32 11培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:>98.0%(GC)

Providencia│sp. 中文名稱:普羅菲登斯菌種屬:Providencia│sp.提供形式:其他安全等級:3模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:34 -培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:>98.0%(GC)

Salmonella│II 中文名稱:沙門氏菌第Ⅱ亞屬種屬:Salmonella│II提供形式:其他安全等級:2模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:>98.0%(GC)

Citrobacter│freundii 中文名稱:弗勞地拘櫞酸桿菌種屬:Citrobacter│freundii提供形式:其他安全等級:3模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:6 16培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0051生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:>98.0%(GC)

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 耐久腸球菌 PCR檢測試劑盒 50T
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