特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡(jiǎn)便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測(cè)的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來(lái)說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來(lái)，從而使其發(fā)出熒光。檢測(cè)到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無(wú)需通過熔解曲線檢測(cè)，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測(cè)產(chǎn)物長(zhǎng)度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來(lái)也叫Real-Time PCR，是美國(guó)PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
3β-乙酰氧基-7,25-甘遂二-24(R)-（標(biāo)準(zhǔn)品）Phospho-TAK1 (Thr184/187) (90C7) Rabbit mAb氯-溴吡啶

11-羥基柳杉酚（標(biāo)準(zhǔn)品）Human Inrleukin-21 (hIL-21)氯吡啶-甲

L-酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-PLCγ1 (Ser1248) Antibody羥基-甲

構(gòu)樹A（標(biāo)準(zhǔn)品）Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (D3F9) XP® Rabbit mAb溴-2-

Oleanolic acid-O-β-D-glucopyranosyl (1→2)-α-L-arabinopyranosidePhospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (D3F9) XP® Rabbit mAb溴-甲酸

Sapindoside APhospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (D3F9) XP® Rabbit mAb溴-5-氯吡啶

卡博替尼蘋果酸鹽 ;XL184(S)-malaMethyl-Histone H3 (Lys79) Antibody Sampler Kit溴-7-氮雜吲哚

Presapogenin CP4PLK1 (208G4) Rabbit mAb溴噻吩-2-甲酸

12-O-Tiglylphorbol-13 –isobutyraPLK1 (208G4) Rabbit mAb氧代-1-哌羧酸叔丁酯

佛波12-十四酸酯1乙酸酯Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257) (C36C11) Rabbit mAb乙酰吲哚

藤黃酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257) (C36C11) Rabbit mAb乙氧基酸乙酯

五味子酚（標(biāo)準(zhǔn)品）SV40 Large T Antigen (D1E9E) Rabbit mAb (Sepharose® Bead Conjuga)吲哚甲酸

宋果靈（華北、一枝蒿庚素）（標(biāo)準(zhǔn)品）Cool1/βPix Antibody(溴甲基)吡啶鹽酸鹽

L-gamma-谷氨酰-對(duì)-Phospho-LAT (Tyr255) Antibody4,6-二氯煙酸

FMOC-3,5-二-L-酪氨酸mTOR (L27D4) Mouse mAb叔丁氧羰基氨基哌啶

布比卡因,丁吡卡因MIS-R2 Antibody氨基-5-氯-2-甲氧基甲酸

布比卡因(標(biāo)準(zhǔn)品)TIM-3 (D5D5R™) XP® Rabbit mAb氨基-5-咪唑甲酰鹽酸鹽

馬來(lái)酸桂哌齊特TIM-3 (D5D5R™) XP® Rabbit mAb氨基-5-羥基-2-甲基嘧啶
犬附紅細(xì)胞體探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒海獅ELISA試劑盒AchE/FITC  熒光素標(biāo)記乙酰膽酶抗體IgG1Kit

海獅孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒CHRNA2/FITC  熒光素標(biāo)記煙型乙酰膽受體A2(神經(jīng)型)抗體IgG100 ul

海獅*狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒 Beta-Actin/Gold  金標(biāo)記β-肌動(dòng)蛋白抗體IgG20 ul

海獅皮質(zhì)(Cortisol)ELISA試劑盒Acinus L/S/FITC  熒光素標(biāo)記腺泡Acinus L/S抗體IgG100 ul

海獅甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒Acinus(phospho S1180)/FITC  熒光素標(biāo)記腺泡酸化Acinus抗體IgG100 ul

海獅睪酮(T)ELISA試劑盒Ack1/FITC  熒光素標(biāo)記Ack1抗體IgG100 ul

海獅雌二(E2)ELISA試劑盒Ack1(Phospho-Tyr284) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗、大、Ack1抗體IgG100 ul

鮭魚ELISA試劑盒Phospho-Ack1(Tyr857/858) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗、Ack1抗體IgG100 ul

鮭魚促胰液素/胰泌素(SCT)ELISA試劑盒Phospho-Ack1(Tyr326) /FITC  熒光素標(biāo)記兔抗、大、Ack1抗體IgG20 ul