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海藻百伯史坦菌探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2024-08-26
點擊次數(shù):
1039
產(chǎn)品特點:
海藻百伯史坦菌探針法熒光PCR檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次海藻百伯史坦菌探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

海藻百伯史坦菌探針法熒光PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Bibersteinia trehalosi

貨號

 YSP96435

熒光染料的優(yōu)點:
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價格便宜;
熒光染料的缺點:
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
?
熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標記熒光基團,3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點:
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點:
成本高;
設(shè)計難度大;
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理:
擴增曲線
在Real- qPCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
?
熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
D-葡糖糖-6-酸二鈉二水USP13 (D4P3M) Rabbit mAb氯-氟

亞硫酸氫鈉(AR)TBP (D5G7Y) Rabbit mAb2-氯-4,5-二氟甲酸

丁二酸鈉(AR)Glucose-6-Phospha Dehydrogenase (G6PD) Activity Assay KitN-乙基乙二

氯化銅二水(AR)ELAVL1/HuR (D9W7E) Rabbit mAb四氫吡喃-羧酸甲酯

牛血紅蛋白Smad2 (D43B4) XP® Rabbit mAb (Biotinylad)乙氧甲?;鶃喖谆?/span>

乙酸鈉CXXC1 Antibody氯甲酸酯

聚乙二10000Lamin B1 (D4Q4Z) Rabbit mAb嗎啉酮

DL-蘋果酸Adipogenesis Marker Antibody Sampler KitN,N-二甲基異

高酸鈉(AR)MITF (D5G7V) Rabbit mAbBoc-L-焦谷氨酸甲酯

硫酸亞鐵七水(AR)α-Parvin (D7F9) XP® Rabbit mAb (Sepharose® Bead Conjuga)甲鋰

酸三HSP27 Antibody Sampler Kit4,6-二甲基-2-羥基嘧啶

鈣黃綠素二鈉鹽Phospho-VEGF Receptor 2 Antibody Sampler KitBoc-甲氨基哌啶

植酸鈉Cleaved Caspase-8 (Asp391) (18C8) Rabbit mAb (PE Conjuga)3,4,5-三氟

乙二四乙酸鐵鈉鹽HEXIM1 (D5Y5K) Rabbit mAb2-氨基異煙酸乙酯

菊粉;菊糖16% Formaldehyde2-氨基煙酸乙酯

三氯化鐵,六水(AR)Phospho-Histone H2A.X (Ser139) Blocking Peptide二甲基氨磺酰氯

孔雀綠DMSO (Dimethyl Sulfoxide)6-甲基噠-3[2H]-酮

聚乙二2000DMSO (Dimethyl Sulfoxide)溴-氟甲
海藻百伯史坦菌探針法熒光PCR檢測試劑盒山羊骨性酸酶(BALP)ELISA試劑盒E.coli DH-5 Alpha  DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體20 ul

山羊骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒E.coli O157:H7  大腸桿菌埃希氏菌O157抗體(腸出血性大腸桿菌埃希氏菌O157:H7)100 ul

山羊骨保護素(OPG)ELISA試劑盒EPEC/E.coli  腸致病性大腸桿菌抗體1 Kit

山羊谷胱甘肽還原酶(GSR)ELISA試劑盒E.coli/EPEC  抗普通大腸埃希菌菌體蛋白抗體100 ul

山羊谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)ELISA試劑盒E.coli O139  抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體(仔豬水腫病志賀毒素大腸桿菌O139)100 ul

山羊孤腓肽(OFQ/N)ELISA試劑盒EP3  E受體3抗體100 ul

山羊睪酮(T)ELISA試劑盒Ephrin A1   EphA1抗體100 ul

山羊肝脂酶(HL)ELISA試劑盒EphA4  酪氨酸蛋白激酶A4抗體1 Kit

山羊膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)ELISA試劑盒Ephrin B  Ephrin B抗體100 ul

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 海藻百伯史坦菌 探針法 熒光PCR檢測試劑盒
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