PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實(shí)驗(yàn)時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強(qiáng)度信號，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
4,4'-聯(lián)吡啶(>98%,BR)FABP1 (D2A3X) XP® Rabbit mAb羥基-三氟甲酸

4,二羥基二砜(>98%,BR)FABP1 (D2A3X) XP® Rabbit mAb6(5H)-5-氮雜菲酮

4,5-二氯熒光素(>98%,BR)SignalSilence® TNF-R1 siRNA I (Mouse Specific)亞硫酸二乙酯

溴異喹啉(>98%,BR)TFIIE-α Antibody雙乙酰乙酰對二

對溴氧乙酸(>95%,Ind Grade)TNF-R1 (D3I7K) Rabbit mAb (Rodent Specific)2-氨基-基嘧啶

對基甲酸(>98%,BR)PSMG1/PAC1 Antibody2-?；姿?/span>

對乙氧基甲(>98%,BR)SIRPα/SHPS1 (D6I3M) Rabbit mAb二氫獼猴桃內(nèi)酯

羥基(>98%,BR)SignalSilence® PTP1B siRNA II氯-甲氧基井鹽酸鹽

甲酸(>98%,BR)Armis (D7O8V) Rabbit mAb氟-甲

對甲(>98.5%,BR)p130 Cas (E1L9G) Rabbit mAb2-氟-5-酚

對甲氧基乙酮(>98%,BR)CYP3A4 (D9U6N) Rabbit mAb戊基環(huán)己

甲氧基酚(>98%,BR)UBE1L2/UBA6 Antibody溴-甲酸甲酯

對甲基肉桂酸(>98%,BR)TRIM33 (E1N2Z) Rabbit mAb溴-甲氧基-5-硝基吡啶

甲基傘形酯-N-乙酰-b-D-氨基半糖苷(>98%,BR)PGD Antibody溴-5-硝基吲唑

甲(>98%,BR)ATP-Citra Lyase (D1X6P) Rabbit mAb2-氯-喹啉甲

對硝基芐(>98%,BR)PSMC5/TRIP1 Antibody庚酸異丁酯

硝基溴化芐(>98%,BC)NUP98 (C39A3) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)對氯甲酸叔丁酯

硝基芐氯(>98%,BR)LC3A/B (D3U4C) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)5-羥基-甲基吲哚
牛巨細(xì)胞病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒胍基丁脲水解酶/凝集酶(AGMAT)ELISA試劑盒GDF-9  生長分化因子9抗體100 ul

瓜氨酸ELISA試劑盒GDNF  膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體100 ul

骨織素(Ostn)ELISA試劑盒Gelsolin  凝溶膠蛋白抗體100 ul

骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒GFAP  膠質(zhì)纖維酸性蛋白抗體20 ul

骨形成蛋白4(BMP4)ELISA試劑盒GFP  綠色熒光蛋白（免疫組化用抗體）100 ul

骨涎蛋白(BSP)ELISA試劑盒GFP  綠色熒光蛋白抗體100 ul

骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)ELISA試劑盒GFP  綠色熒光蛋白抗體20 ul

骨特異性性酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒EGFP Tag  重組增強(qiáng)型綠色熒光蛋白標(biāo)簽抗體100 ul

骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA試劑盒GFRA4  GDNF家族受體α-4抗體100 ul