PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。

?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實(shí)驗(yàn)時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強(qiáng)度信號，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
羥基纖維素（4000mpas）RECK (D8C7) Rabbit mAb2-氟磺酰氯

麥芽糖;淀粉糖Hydroxy-HIF-1α (Pro564) (D43B5) XP® Rabbit mAb2-氯磺酰氯

ONX-0914 (PR-957)Hydroxy-HIF-1α (Pro564) (D43B5) XP® Rabbit mAb乙炔聯(lián)

N-壬?；?N-甲基葡萄糖(MEGA9)Flotillin-2 (C42A3) Rabbit mAb間氯異酸酯

甲基纖維素(100000mPa.s)AMPA Receptor 3 (GluA 3) Antibody2-(*硅基)乙

甲基纖維素(4000 mPa.s)Phospho-PDK1 (Ser241) (C49H2) Rabbit mAb三鈉

對基-β-D-吡喃半糖苷(PNPG)Phospho-PDK1 (Ser241) (C49H2) Rabbit mAb2 , 二溴-5-甲基吡

D-核糖(標(biāo)準(zhǔn)品)Notch1 (C37C7) Rabbit mAb三氟磺酸銀

D-核糖Chk2 (1C12) Mouse mAb三氟肼鹽酸鹽

二硫蘇糖(DTT)Chk2 (1C12) Mouse mAb5-溴-2-氟

D(+)-松二糖Phospho-S6 Ribosomal Proin (Ser235/236) (D57.2.2E) XP® Rabbit mAb (PE-Cy®7 Conjuga)氟肼鹽酸

D-果糖-1,6-二酸三鈉鹽GOT1 (E4A4O) Rabbit mAb2-氟-甲基-5-溴吡啶

海帶多糖；昆布糖 (來自褐藻類)S100A9 (D5O6O) Rabbit mAb (IHC Formulad)L-甘氨酸

胰酶(1:250)，胰酶粉Phospho-HDAC4 (Ser246)/HDAC5 (Ser259)/HDAC7 (Ser155) (D27B5) Rabbit mAb巰基酸甲酯

木瓜蛋白酶(800u/mg)Phospho-HDAC4 (Ser246)/HDAC5 (Ser259)/HDAC7 (Ser155) (D27B5) Rabbit mAb2-氨基-5-甲酸

木瓜蛋白酶(2000u/mg)HA-Tag (6E2) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2-氯煙酸

胰酶(1:2500)GST (26H1) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2,二甲

胰酶(1:4500)Notch3 (8G5) Rat mAb2-巰基-5-甲基-1,3,噻二唑
巨細(xì)胞病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒RGS2  G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗體100 ul

活化凝血因子X(FXa)ELISA試劑盒RGS5  G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子5抗體20 ul

活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒RhoA  RhoA抗體100 ul

磺基轉(zhuǎn)移酶(SULT1A1)ELISA試劑盒Rho C  RhoC抗體20 ul

黃體生成素(LH)ELISA試劑盒RIP2  受體結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶2抗體100 ul

氧化酶(XOD)ELISA試劑盒Phospho-RIP2 (Ser176)  酸化受體結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶2抗體100 ul

環(huán)酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒RIP3  受體結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶3抗體100 ul

環(huán)酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒RICTOR  雷帕霉素靶蛋白復(fù)合體2抗體100 ul

環(huán)加氧酶2(COX-2)ELISA試劑盒Phospho-Rictor (Thr1135)  酸化雷帕霉素靶蛋白復(fù)合體2抗體100 ul