特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
2'-脫氧-2',2'-二氟尿嘧啶核苷DKK2 (N70) Antibody鄰甲磺酰

米卡芬凈鈉SFRP1 Antibody2-氨基磺酸

羊藿次苷F2TNFRSF8/CD30 (E7E4D) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)二二硫

2,6-二氯并惡唑 Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb二基重氮

多韋替尼Akt (pan) (C67E7) Rabbit mAb2-氯-5-氟-吡啶

乙酰黃芪皂苷IAkt (pan) (C67E7) Rabbit mAb氨基-5-溴-2-甲氧基吡啶

5-基-2,戊二酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Phospho-YAP (Ser109) AntibodyN-Boc-(S)-甲酸哌啶

醋酸布舍瑞林BMP7 Antibody(±)芐基氧基羰基-a-膦酰甘氨酸*酯

司骨化MEK1/2 (L38C12) Mouse mAb2,5-二特丁基對二酚

25-羥麥角甾p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb3,5-雙(三氟甲基)肼

甲酸阿格列汀p44/42 MAPK (Erk1/2) (137F5) Rabbit mAb氨基四

利拉魯肽p44/42 MAPK (Erk1/2) (L34F12) Mouse mAb2-氟-甲

MK4827 (Niraparib)Human BMP-22-溴-6-氟

S-2-羥基戊二酸hnRNP K (A222) Antibody(溴甲基)三氟酸

去氮腺嘌呤TNFRSF8/CD30 (E7E4D) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 594 Conjuga)2,5-二氯異煙酸

氧代維甲酰酚Ingrin β3 Antibody依達(dá)拉奉

氨基-1-戊Phospho-Glycogen Synthase (Ser641) (D4H1B) XP® Rabbit mAb氯-基吡啶

2,5-二溴甲酸 Phospho-Glycogen Synthase (Ser641) (D4H1B) XP® Rabbit mAb三異基硅基乙炔
馬皰疹病毒通用探針法熒光PCR檢測試劑盒魚類促性腺激素釋放激素(GnRH)ELISA試劑盒ANXA1(Annexin A1)/FITC  熒光素標(biāo)記膜粘連蛋白A1抗體IgG100 ul

魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒AP/ALP/FITC   熒光素標(biāo)記抗性酸酶抗體IgG20 ul

魚類白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒beta Adaptin/AP2/FITC  熒光素標(biāo)記銜接蛋白β抗體IgG100 ul

魚巨噬細(xì)胞遷移抑制因子(MIF)ELISA試劑盒 Gamma-Adaptin/FITC  熒光素標(biāo)記銜接蛋白γ抗體IgG100 ul

魚金屬硫蛋白2(MT-2)ELISA試劑盒AP2 alpha/FITC  熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄激活蛋白2α抗體IgG100 ul

魚金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒alpha Adaptin/FITC  熒光素標(biāo)記銜接蛋白1抗體IgG20 ul

魚黃體生成素(LH)ELISA試劑盒Apaf-1 /FITC  熒光素標(biāo)記凋亡蛋白活性因子-1抗體（C端）IgG100 ul

魚紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒Apaf-1/FITC  熒光素標(biāo)記凋亡蛋白活性因子-1抗體（N端）IgG20 ul

魚黑色素ELISA試劑盒Proin C/FITC  熒光素標(biāo)記APC活化蛋白C抗體IgG100 ul