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豬腸道杯狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

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更新日期:
2020-11-16
點(diǎn)擊次數(shù):
832
產(chǎn)品特點(diǎn):
豬腸道杯狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
  50T豬腸道杯狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)的詳細(xì)資料:

實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

?

產(chǎn)品名稱

豬腸道杯狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

 英文名稱

 Porcine Enteric Calicivirus(PECV)RTPCR

 貨號(hào)

 HE31401-R

使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
    1.   特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
    2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
    3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
    4.   實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
     5.   優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
    6.   優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
Chicken α-Glucosidase,a-Glu ELISA試劑盒 Azacitidine (5-Azacytidine)純度> 98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

Chicken β-lactamase ELISA試劑盒Azacitidine (5-Azacytidine)純度> 98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

Chiken Pullorum Diseaes,PD ELISA試劑盒Azacitidine (5-Azacytidine)純度> 98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

citAzacitidine (5-Azacytidine)HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Cobra venom factor,CVF ELISA試劑盒Azelastine HCl純度>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

Deer Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA試劑盒 Azelastine HCl純度>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

Deer erythrocyte membrane protein,EMP ELISA試劑盒 Azelastine HClHPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Deer Insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP-3 ELISA試劑盒 Azithromycin945-1030 ug /mg,二水物

Deer Serum amyloid A,SAA ELISA試劑盒Azithromycin945-1030 ug /mg,二水物

deoxypyridinoline,DPD ELISA試劑盒 Azithromycin945-1030 ug /mg,二水物

differentiation 40 ligand,sCD40L ELISA試劑盒Azithromycin效價(jià)測(cè)定

Dolichos bifows agglutinin,DBA ELISA試劑盒Aztreonam> 95%,BR

Duck anti-prothrombins antibodies,aPT1/aPT2 ELISA試劑盒 Aztreonam> 95%,BR

Duck carbonic anhydrase,CA ELISA試劑盒 Aztreonam> 95%,BR

Duck cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA試劑盒 Aztreonam> 95%,BR

38736-77-5Micrococcal Nuclease8000 units豬胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)免疫試劑盒

490-46-0Exonuclease III4000 units豬胰島素(INS)免疫試劑盒

1257-08-5RNase H100 units豬胰蛋白酶(Trypsin)免疫試劑盒

1072-93-1RNase H500 units豬一氧化氮(NO)免疫試劑盒

970-74-1S1 Nuclease10000 units豬氧還原蛋白過(guò)氧化物酶2(PRDX2)免疫試劑盒

989-51-5Uracil-DNA Glycosylase200 units豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)免疫試劑盒

 Uracil-DNA Glycosylase5x200 units豬血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)免疫試劑盒

CAS:6873-9-2DNase I, RNase-free1000 units豬血小板活化因子(PAF)免疫試劑盒
豬腸道杯狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)β淀粉樣蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白1抗體Isorhoifolin別名: Apigenin 7-O-rutinoside分子式: C27H30O14性狀: Yellow powder純度: 99.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 黃酮;黃酮苷;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體Glabridin別名: 分子式: C20H20O4性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物抗毒素;甘草;異黃烷;異戊烯基黃酮;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶3抗體Euchrestaflavanone B別名: Lespedezaflavanone D分子式: C25H28O6性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 二氫黃酮;異戊烯基黃酮;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

二磷腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶5抗體Caryatin別名: 分子式: C17H14O7性狀: Yellow powder純度: 98.0%特色服務(wù):  隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞:  中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

腺苷單磷脫氨酶1抗體Hispidulin 4'-O-glucoside別名: 分子式: C22H22O11性狀: Yellow powder純度: 98.0%特色服務(wù):  隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

紅細(xì)胞蛋白Ank1抗體Lutonarin別名: Isoorientin 7-O-glucoside; 大麥黃苷分子式: C27H30O16性狀: Yellow powder純度: 97.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

腺苷琥珀裂解酶抗體2,3-Dihydro-6-methylginkgetin別名: 分子式: C33H26O10性狀: Powder純度: 96.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)

α1B糖蛋白抗體Mauritianin別名: 分子式: C33H40O19性狀: Yellow powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù) 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 豬腸道杯狀病毒 PCR檢測(cè)試劑盒 50T
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