特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實驗手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
遠(yuǎn)志皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)5-氨基-吡唑-甲酸乙酯

月桂（香葉）四乙酰乙二

蕓香柚皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)乙酰乙酸甲酯

澤瀉B醋酸酯(標(biāo)準(zhǔn)品)1,酮二羧酸二乙酯

獐牙菜苷（標(biāo)準(zhǔn)品）溴-2-氟-1-三氟甲氧基

獐牙菜苦苷(標(biāo)準(zhǔn)品)二酸二乙酯

樟腦（標(biāo)準(zhǔn)品）丁酸乙酯

芝麻林素（標(biāo)準(zhǔn)品）乙酸乙酯

芝麻素1,1-二乙氧基乙烷

芝麻素(標(biāo)準(zhǔn)品)碳酸二乙酯

槲皮素-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)2,二酚

知母皂苷A3(標(biāo)準(zhǔn)品)2-氯-5-氯甲基噻唑

知母皂苷BII（標(biāo)準(zhǔn)品）溴-2-氟

2',3'-二脫氧鳥苷(ddG)3,二乙氧基酸乙酯

知母皂苷E(標(biāo)準(zhǔn)品)1,二溴

植酸(標(biāo)準(zhǔn)品)對溴甲

重樓皂苷I（標(biāo)準(zhǔn)品）溴氯

重樓皂苷II（標(biāo)準(zhǔn)品）溴
賈第蟲通用探針法熒光PCR檢測試劑盒?；o酶A脫氫酶短鏈抗體CRACC/Slamf7/CD319R/FITC  熒光素標(biāo)記CD319抗體IgG20 ul

過氧化物酶酰基輔酶A氧化酶1抗體A Raf(phospho Ser214)/FITC  熒光素標(biāo)記酸化A-Raf抗體IgG100 ul

酸化細(xì)胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體A Raf/ARAF/FITC  熒光素標(biāo)記A-Raf抗體IgG100 ul

轉(zhuǎn)化生長因子β誘導(dǎo)蛋白3抗體（半胱氨酸和絲氨酸富含核蛋白1）Phospho-A Raf (Ser299) /FITC  熒光素標(biāo)記酸化A-Raf抗體IgG20 ul

有絲分裂激酶A/B/C抗體Phospho-A Raf (Tyr301/302) /FITC  熒光素標(biāo)記酸化A-Raf抗體IgG1 Kit

蛋白酪氨酸激酶ATK抗體JAM1/CD321/FITC  熒光素標(biāo)記連接粘附分子1抗體IgG100 ul

長鏈脂肪酸輔酶A連接酶1/2抗體cRaf/Raf1(c-raf 1) /FITC  熒光素標(biāo)記抗cRaf/Raf1抗體IgG100 ul

過氧化物酶?；o酶A氧化酶2抗體CREB-1/FITC  熒光素標(biāo)記環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體IgG100 ul

膽固?；D(zhuǎn)移酶1抗體P-CREB-1/FITC  熒光素標(biāo)記酸化環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體IgG20 ul