特別提示：本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點：
產品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產物結合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產物會影響結果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決?？偟膩碚f，SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。
?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結合到模板上，探針的結合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術解決了熒光染料與非特異性擴增結合的問題，反應結束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術的缺點：
成本高；
設計難度大；
只能用于檢測產物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產物量與起始模板量之間無線性關系，所以根據(jù)終的PCR產物量不能計算出初始模板量。
?
熒光定量PCR原理：
產品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術。該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產物量的變化。而在平臺期，擴增產物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產物量與起始模板量之間沒有線性關系，根據(jù)終的 PCR 產物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
DNA酶,脫氧核糖核酸酶ⅠPhospho-Histone H3 (Ser10) (D2C8) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2,5-二氟甲酸

高峰淀粉酶來源于米曲霉(4000U/g)1BB/CD137/TNFRSF9 (D2Z4Y) Rabbit mAb基*氧基硅烷

高峰淀粉酶來源于米曲霉(100U/mg )Phospho-FLT3 (Tyr591) Antibody2,2'-偶氮二異丁基脒

甘油-酸脫氫酶FLT3 (8F2) Rabbit mAb

菠蘿蛋白酶Phospho-FLT3 (Tyr969) (C24D9) Rabbit mAb2-氟磺酰

DL-對氨酸Clusrin (D7N2K) XP® Rabbit mAb辛酸亞錫

延胡素酸氨基酯Clusrin (D7N2K) XP® Rabbit mAb肼(無水)

輔羧酶;羧化輔酶;焦酸硫素Ajuba (D4D8P) Rabbit mAb鹽酸丁脒

吲哚乙酸酯Phospho-FLT3 (Tyr589/591) (30D4) Rabbit mAb硫酸鹽

α-環(huán)糊精Phospho-Histone H3 (Ser10) (D2C8) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)哌-2-羧酸

氧化酶(XOD)Phospho-FLT3 (Tyr591) (54H1) Mouse mAb3,二氯甲酰氯

?；?L-氨基?；窹erilipin-1 (K117) Antibody2-氨基-N-(2-氯-6-基)噻唑-5-甲酰

胰蛋白酶1:250eIF4G2/p97 (D1A10) Rabbit mAb2-氨基-5-溴噻唑

胰蛋白酶1:2500TrK (pan) (A7H6R) Rabbit mAb (Biotinylad)硝基咪唑

阿利多eIF4H (D85F2) XP® Rabbit mAb1-甲基-硝基咪唑

核糖核酸酶A(美侖)；RNase A;核糖核酸酶IeIF4H (D85F2) XP® Rabbit mAb5-溴噻唑

5‘-酸吡哆，一水Perilipin-1 (D418) Antibody2-咪唑

NADPH;還原輔酶Ⅱ四鈉鹽;(羅氏)Phospho-FGF Receptor (Tyr653/654) Antibody2-(三氟甲基)基乙
指環(huán)蟲屬通用探針法熒光PCR檢測試劑盒核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒Rb/P105 RB  成視網(wǎng)膜細胞瘤抑癌蛋白抗體100 ul

和肽素(copeptin)ELISA試劑盒phospho-Rb/p105-Rb(Ser780)  酸化成視網(wǎng)膜細胞瘤抑癌蛋白抗體20 ul

含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2(Tie-2)ELISA試劑盒RRAD  RRAD抗體100 ul

含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶1(Tie-1)ELISA試劑盒Rsk2/MAPKAP Kinase 1b  核糖體S6激酶RSK2抗體100 ul

過氧化脂質/過氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒Phospho-RSK2 (Ser227)  酸化核糖體S6激酶RSK2抗體20 ul

過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA試劑盒Phospho-RSK2 (Tyr529)  酸化核糖體S6激酶RSK2抗體100 ul

過氧化物酶體增殖物激活受體β(PPAR-B/PPARD)ELISA試劑盒RSK3/Ribosomal S6 kinase 3  核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體20 ul

過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒Phospho-RSK3 (Thr353/356)   酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體500 ul

*酶(CAT)ELISA試劑盒Phospho-RSK3 (Thr356/Ser360)   酸化核糖體蛋白S6激酶家族RSK3抗體100 ul