PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
甲噻;賽拉NCK1 (5B7) Mouse mAbN-乙基-2-氨甲基吡咯烷

酵母多糖 A(>98% (HPLC),BC)TAF1 (D6J8B) Rabbit mAb1-N-Cbz-甲?；量┩?/span>

3,5-二甲酸(>98%,BR)XBP-1s (D2C1F) Rabbit mAb2,2-二乙氧基烷

40%乙溶液Phospho-Progesrone Receptor (Ser345) Antibody乙?；量┩?/span>

硫酸鈣(>99%,BR)Human Inrleukin-6 Receptor α (hIL-6Rα)三乙氧基（2-甲基基）硅烷

硝酸鈷六水(>98.0-102.0%,BR)Human Inrleukin-6 Receptor α (hIL-6Rα)三乙氧基-(2-咪唑-1-啉基)烷基硅烷

二環(huán)己基碳二亞(>99%,BR)CDK4 (D9G3E) Rabbit mAb三乙氧基硅烷

鹽酸鑭六水(>99%,BR)CDK4 (D9G3E) Rabbit mAb基三乙氧基硅烷

三氧化鉬(>98%,BR)Glutama Dehydrogenase 1/2 (D9F7P) Rabbit mAb正辛基三乙氧基硅烷

氯化鎳六水(>98%,BC)GLDC Antibody2-氯-1,1,1-三乙氧基乙烷

木瓜蛋白酶懸浮液AFAP1L2/XB130 (D4A5) Rabbit mAb(S)-(-)-2-氨基丁烷

磺酸鈉(>98%，BR)CYLD (D6O5O) Rabbit mAb(R)-(-)-2-氨基丁烷

過氧化物歧化酶(SOD)Acetyl-Histone H2B (Lys5) (D5H1S) XP® Rabbit mAb三乙烷基（三氟甲基）硅烷

四正丁基溴化銨(>98%,BC)Acetyl-Histone H2B (Lys5) (D5H1S) XP® Rabbit mAb1,二乙酰氧-2-(二乙酰氧氧基)烷

三十烷(>98%,植物激素級(jí))STF-1 (D1Z2A) XP® Rabbit mAb甲基二乙氧基硅烷

羥基甲(>98.0%，BR)K48-linkage Specific Polyubiquitin (D9D5) Rabbit mAb (HRP Conjuga)2,4,6-三乙基-2,4,6-*基環(huán)三硅氧烷

低內(nèi)毒素牛血清白蛋白PDBu (Phorbol 122,2,2-三氟乙磺酸酯

梭菌蛋白酶PTMScan® Cleaved Caspase Substra Motif [DE(T/S/A)D] Kit(R)-(-)-2-氨基-1-芐氧基丁烷
飾紋汀蛙虹彩病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒降脂素(Adipsin)ELISA試劑盒EXPB-2  植物延展素-β100 ul

降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒AXPA10  植物延長蛋白（擬南芥）100 ul

降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒Ezrin/Radixin  埃茲蛋白抗體100 ul

降鈣素(CT)ELISA試劑盒Phospho-Ezrin (Tyr353)  酸化埃茲蛋白抗體100 ul

性胎兒蛋白(BFP)ELISA試劑盒Phospho-Ezrin (Thr567)  酸化埃茲蛋白抗體5 mg

性酸酶(ALP)ELISA試劑盒F1 operon positive regulatory proin(NT)  肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體（N端）1 mg

性亮氨酸拉鏈轉(zhuǎn)錄因子ATF樣蛋白(BATF)ELISA試劑盒F1 operon positive regulatory proin(CT)  肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體（C端）100 ul

性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒instinal FABP/IFABP  腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體100 ul

間皮素(MSLN)ELISA試劑盒FABP(brain) CT  腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體(C端)50 mg