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蠟樣芽胞桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2020-11-25
點擊次數(shù):
755
產(chǎn)品特點:
蠟樣芽胞桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次蠟樣芽胞桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細資料:

PCR技術(shù)的定量原理:
擴增曲線
在Real- qPCR中,對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應的進行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板,從而進入“平臺期”。在該時期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點:
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價格便宜;
熒光染料的缺點:
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別,進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決??偟膩碚f,SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。

產(chǎn)品名稱

蠟樣芽胞桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Bacillus cereus

貨號

 YSP96415

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熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標記熒光基團,3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時,引物與該探針同時結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時,Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題,反應結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點:
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點:
成本高;
設計難度大;
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應的進行,PCR反應產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
托瑞米芬(標準品)CAD Antibody甲基水楊酸甲酯

來那替尼Oligophrenin-1 Antibody2-氨基噻唑-5-甲酸甲酯

甲基原薯蕷皂苷(標準品)Cytochrome c (D18C7) Rabbit mAb5-硝基香蘭素

纖細薯蕷皂苷(標準品)Cytochrome c (D18C7) Rabbit mAb2,二氯丁酮

鹽酸育亨賓OTX2 (D7Y3J) Rabbit mAb6-氯-2-吡啶羧酸甲酯

鹽酸育亨賓(標準品)CaMKII-α (D10C11) Rabbit mAb2,6-二氯甲酰氯

甲磺酸酚妥拉明TNF-α (D2D4) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific)2-甲基-硝基三氟甲

甲磺酸酚妥拉明(標準品)TNF-α (D2D4) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific)6-甲氧基煙酸

斑蝥素SimpleChIP® Human CDKN1B Promor Primers2,二氟-6-甲

斑蝥素(標準品)SimpleChIP® Human EGR1 Intron 3 Primers1-(溴基)哌

維羅非尼,RG7204DLST (D22B1) XP® Rabbit mAb二氟*

白花前胡素EDLST (D22B1) XP® Rabbit mAb5-甲氧基色鹽酸鹽

白花前胡甲素(標準品)SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb2-氯吡啶-5-磺酰氯

去甲斑蝥素ADAP Antibody2-氯-溴噻吩

去甲斑蝥素(標準品)PhosphoPlus® Smad2 (Ser465/467) Antibody Duet2-氯-6-氟

反式玉米素MAML1 (D3E9) Rabbit mAb酮基膦酸二乙酯

氯亞鉑酸 Phospho-Stat3 (Tyr705) Blocking Peptide甲基噻吩

環(huán)黃芪Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjuga)2-基咪唑
蠟樣芽胞桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒B細胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)ELISA試劑盒Cyclin A  周期素A抗體100 ul

B細胞活化因子(BAFF)ELISA試劑盒Cyclin B1  周期素B1抗體20 ul

BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導蛋白(Bid)ELISA試劑盒Phospho-Cyclin B1 (Ser147)  酸化周期素B1抗體100 ul

Bcl-2相關X蛋白(BAX)ELISA試劑盒Phospho-Cyclin B1 (Ser133)  酸化周期素B1抗體100 ul

Apelin ELISA試劑盒Cyclin C  周期素C抗體20 ul

Apelin 13(AP13)ELISA試劑盒Cyclin D1  周期素D1抗體100 ul

8異F2α(8-iso-PGF2a)ELISA試劑盒Phospho-Cyclin D1 (Thr286)  酸化cyclin D1抗體100 ul

8異(8-iso-PG)ELISA試劑盒Cyclin D2  周期素D2抗體100 ul

8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒Cyclin D3  周期素D3抗體100 ul

產(chǎn)品相關關鍵字: 蠟樣芽胞桿菌 探針法 熒光PCR檢測試劑盒
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