特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
六氯標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.100mg/ml,基體：異辛烷）LSR (D3E3N) XP® Rabbit mAb1-十二烷基-甲基咪唑四氟酸鹽

β-六六六（標(biāo)準(zhǔn)品）LSR (D3E3N) XP® Rabbit mAb1,3,5-三(溴甲基)

七氯標(biāo)準(zhǔn)溶液（100μg/ml,溶劑：甲）CIP2A (D1M3H) Rabbit mAb2,5-二氟-羥基甲

外環(huán)氧七氯標(biāo)準(zhǔn)溶液（100μg/ml,基體：石油）APC10 Antibody二茂鐵甲

外環(huán)氧七氯標(biāo)準(zhǔn)溶液（10μg/ml,基體：石油）PTMScan®Pan-Methyl Lysine Kit異丁酸甲酯

氟吡禾靈（標(biāo)準(zhǔn)品）NUB1 Antibody溴-3,5-二

 N-異基（標(biāo)準(zhǔn)品）VAMP7 (D4D5J) Rabbit mAb2--5-(三氟甲基)溴芐

吡蟲啉（標(biāo)準(zhǔn)品）PLK2 (D5R2B) Rabbit mAb鎳鋁

稻瘟靈（標(biāo)準(zhǔn)品）RSK1/RSK2/RSK3 (D7A2H) Rabbit mAb9,9-二己基-2,7-二溴代芴

咪唑乙煙酸（標(biāo)準(zhǔn)品）B-Raf (D9T6S) Rabbit mAb2-氯-6-

異?。?biāo)準(zhǔn)品）OTUD7B/Cezanne-1 Antibody氯 B

甲咪唑煙酸（標(biāo)準(zhǔn)品）c-Myc (D84C12) Rabbit mAb (PE Conjuga)2-三氟甲氧基基異酸酯

水硫（標(biāo)準(zhǔn)品）ATRX (D1N2E) Rabbit mAb5-氟吡啶-甲

亞硫（標(biāo)準(zhǔn)品）BRCA1 (A8X9F) Rabbit mAb甲氧基-甲酸

異標(biāo)準(zhǔn)溶液（10μg/ml,u=6%）TRF2 (P449) Antibody戊二酸甲酯

抑霉唑（標(biāo)準(zhǔn)品）Rhodopsin (D1N7X) Rabbit mAb甲基-戊

春雷霉素鹽酸鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）Ikaros (D6N9Y) Rabbit mAb五氟酸乙酯

標(biāo)準(zhǔn)溶液（10μg/ml,u=4%）Phospho-Skp2 (Ser64) Antibody2-羥基-5-氨基吡啶鹽酸鹽
胎兒彎曲桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒次氧化酶ELISA試劑盒IKK beta  KB抑制蛋白激酶β抗體125 ml

雌酮(estrone,E1)ELISA試劑盒IKK gamma   KB抑制蛋白激酶γ抗體100 ul

雌三(E3)ELISA試劑盒IKB beta  核因子κB抑制蛋白β抗體100 ul

雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2 ELISA試劑盒phospho-IkB beta (Ser23)  酸化KB抑制蛋白β抗體100 ul

雌激素受體β(ESR2)ELISA試劑盒IKB alpha   核因子κB抑制蛋白α抗體100 ul

雌激素硫酸轉(zhuǎn)移酶(SULT1E1)ELISA試劑盒phospho-IKK alpha (Thr23)  酸化KB抑制蛋白激酶α抗體100 ul

雌激素(E)ELISA試劑盒phospho-IKK alpha (Tyr463)  酸化KB抑制蛋白激酶α抗體100 ul

雌二受體(ER)ELISA試劑盒phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180)  酸化KB抑制蛋白激酶α抗體100 ul

雌二(E2)ELISA試劑盒Phospho-IKK alpha/IKK beta (Ser180/Ser181)  酸化KB抑制蛋白激酶α/β抗體100 ul