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馬可尼小囊蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒

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更新日期:
2020-12-01
點(diǎn)擊次數(shù):
960
產(chǎn)品特點(diǎn):
馬可尼小囊蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
  50次馬可尼小囊蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒的詳細(xì)資料:

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

馬可尼小囊蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Mikrocytos mackini

貨號

 YSP96921

熒光染料的優(yōu)點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便;
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合;
價(jià)格便宜;
熒光染料的缺點(diǎn):
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別,進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說,SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
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熒光探針:
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針,其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針,該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán),3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近,熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí),引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上,探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí),Taq酶利用5'外切酶活性,將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來,從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比,因此,根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題,反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測,縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn):
熒光背景低;
敏感性高;
雜交穩(wěn)定性高;
熒光光譜分辨率好;
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn):
成本高;
設(shè)計(jì)難度大;
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性,可用于等位基因的辨別,特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理:
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中,對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號,隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系,所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
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熒光定量PCR原理:
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán),收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號,這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
ASAP1 英文名稱: 發(fā)育分化增強(qiáng)因子1抗體 0.1ml

Anti-AMPK beta-1(phospho Ser108) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠酸化腺苷單酸活化蛋白激酶β1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

SHBG(Mouse sex hormone-binding globulin) ELISA Kit 小鼠性激素結(jié)合球蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-CD177/FITC 熒光素標(biāo)記CD177抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Donkey Anti-human IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格 0.1ml

RBC(Rat anti-red cell antibody )ELISA Kit 大鼠抗紅細(xì)胞抗體 96T

MHC Class II 英文名稱: 組織相容性復(fù)合體2抗體 0.1ml

BRCC4 英文名稱: 癌易感基因復(fù)合蛋白4抗體 0.2ml

Anti-phospho-c-Raf(Ser338/Tyr340) 酸化原癌基因c-Raf抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

EHF(Human anti-epidemic hemorrhagic fever virus IgM antibody) ELISA Kit 人抗流行性出血熱病毒抗體IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-IRF7 干擾素調(diào)節(jié)因子7抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh LGR4/GPR48 G蛋白偶聯(lián)受體48抗體 規(guī)格 0.1ml

Beta-CG(Human Chorionic Gonadotrophin Beta) ELISA Kit 人絨毛膜促性腺激素β 96T

p53BP1 英文名稱: p53結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml

甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基250克Mannitol Ferment Medium腸道桿菌的鑒別,細(xì)菌甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)

普通肉湯瓊脂平板50塊Nutrient Agar Plate一般細(xì)菌的培養(yǎng)和細(xì)菌總數(shù)的測定

M-H瓊脂平板10塊M-H Agar Plate

沙保弱氏瓊脂平板10塊沙保弱氏瓊脂平板

克氏鐵瓊脂斜面平板10支KIA Plate

弧菌選擇瓊脂平板10塊TCBS Agar Plate
馬可尼小囊蟲探針法熒光PCR檢測試劑盒細(xì)胞粘附分子4抗體ox-LDL/FITC  熒光素標(biāo)記抗氧化低密度脂蛋白抗體IgG100 ul

鈣調(diào)蛋白結(jié)合轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體OXR /FITC  熒光素標(biāo)記整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體IgG100 ul

周期素依賴性激酶5激活結(jié)合蛋白C53抗體Oxytracycline/FITC  熒光素標(biāo)記土霉素抗體IgG100 ul

著絲粒蛋白H抗體P2P-R/RBBP6 /FITC  熒光素標(biāo)記增殖潛能相關(guān)蛋白抗體IgG100 ul

半胱氨酸蛋白酶抑制劑6抗體P2Y1 receptor/FITC  熒光素標(biāo)記P2Y1受體抗體IgG100 ul

碳酸酐酶相關(guān)蛋白/腦蛋白10抗體P2Y4 receptor/P2ry4 /FITC  熒光素標(biāo)記P2Y4受體抗體IgG1 Kit

白細(xì)胞介素-18受體α鏈抗體P14ARF/FITC  熒光素標(biāo)記抑癌基因p14抗體IgG1 Kit

轉(zhuǎn)錄阻抑蛋白CTCF抗體P16/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗抑癌基因p16抗體IgG100 ul

T淋巴細(xì)胞CD1抗體P19ARF/FITC  熒光素標(biāo)記p19ARF抑癌基因抗體IgG100 ul

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 馬可尼小囊蟲 探針法 熒光PCR檢測試劑盒
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