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鵝免疫球蛋白AELISA檢測試劑盒實驗洗滌方法

點擊次數(shù):711 更新時間:2021-10-19
 

鵝免疫球蛋白AELISA檢測試劑盒洗滌方法:

1. 自動洗板機(jī):每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。

1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育1小時。

3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。

5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時,即可終止)。

7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測程序。

9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。

mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓

MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

 細(xì)胞名稱

NSC,大鼠神經(jīng)干細(xì)胞

RN-h, 大鼠海馬趾神經(jīng)元

rEPC,大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓

RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元

RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元

RSC, 大鼠雪旺細(xì)胞

RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞

RLF, 大鼠淋巴成纖維細(xì)胞

rRTEC, 大鼠腎小管上皮細(xì)胞

rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞

RDFs, 大鼠真皮成纖維細(xì)胞

RLFs, 大鼠肺成纖維細(xì)胞

rCF, 大鼠心臟成纖維細(xì)胞

 細(xì)胞名稱

MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元

MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元

mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞

MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞

MLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞


 
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