在實(shí)驗(yàn)過程中往往會(huì)有不盡人意的地方，比如說ELISA實(shí)驗(yàn)背景過高，那么造成ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)背景過高的主要原因有哪些呢？下面是我公司的一些詳述：
1、底物污染
ELISA試劑盒確保在使用前，底物不被金屬離子或氧化劑污染；在實(shí)驗(yàn)時(shí)留存一些額外的底物，底物本身不應(yīng)該有顏色。
2、不正確的洗滌
洗滌不充分或省略洗滌步驟中的任何一步均會(huì)導(dǎo)致背景色過高。
解決方法：檢查洗滌緩沖液的體積并確保完成所有的洗滌步驟；確保洗滌緩沖液的正確稀釋和正確使用。
3、底物曝光
底物曝光會(huì)使底物變成藍(lán)色，因此在加入板內(nèi)之前要保存在暗處(即試劑瓶?jī)?nèi))。
4、錯(cuò)誤的孵育時(shí)間和溫度
必須嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書來定孵育時(shí)間和溫度。
5、HRP的錯(cuò)誤稀釋
HRP濃度過高會(huì)造成高背景色，因此要嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書稀釋。
6、包被板保存不當(dāng)
ELISA試劑盒如果包被板只用了一部分，一定要正確保存剩余的板條。
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