有限稀釋法對(duì)于篩選雜交瘤來(lái)說(shuō)，是zui普通的方法，在許多實(shí)驗(yàn)室中都在使用。但是，作為相對(duì)舊的技術(shù)，已經(jīng)不能滿(mǎn)足當(dāng)今的需求。方法自身具有許多缺點(diǎn)：
1、人工操作，操作及重復(fù)的步驟太多，不可避免容易出錯(cuò)。
2、速度慢，效率低。只能保證30-40%的孔有細(xì)胞生長(zhǎng)。對(duì)于高通量篩選來(lái)說(shuō)，不能滿(mǎn)足要求。
3、不能保證單克隆，需要亞克隆3-4次，所以，人工和耗時(shí)都較多。
4、有限稀釋在ELISA檢測(cè)前，并不知道哪一個(gè)克隆滿(mǎn)足抗原特異性的要求。所以，需要對(duì)所有克隆，都要zui少做一次ELISA鑒定。
除了有限稀釋方法，現(xiàn)在相對(duì)先進(jìn)的細(xì)胞分選技術(shù)也得到普遍應(yīng)用。一般就是細(xì)胞分選儀或者流失細(xì)胞技術(shù)對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行篩選。其原理是先將細(xì)胞分散開(kāi)，沒(méi)有細(xì)胞結(jié)團(tuán)。通過(guò)在細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)標(biāo)記熒光信號(hào)。當(dāng)單個(gè)細(xì)胞在壓力作用下單個(gè)通過(guò)玻璃毛細(xì)管的時(shí)候，儀器可以自動(dòng)檢測(cè)單個(gè)細(xì)胞的熒光信號(hào)強(qiáng)度。熒光信號(hào)強(qiáng)度反應(yīng)這個(gè)細(xì)胞的相應(yīng)抗體表達(dá)水平。zui后，將高熒光信號(hào)強(qiáng)度的細(xì)胞收集，再通過(guò)有限稀釋得到高水平表達(dá)的單克隆；或者也可以使用單細(xì)胞收集器收集高水平表達(dá)的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞。
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